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美國職業棒球大聯盟（英語：Major League Baseball，縮寫：MLB），通稱美國職棒大聯盟，簡稱美國職棒或大聯盟，是目前世界上最高水準的職業棒球賽事，由29支來自美國各地的球隊以及1支加拿大的球隊組成。
美國職棒大聯盟由1876年成立的國家聯盟與1901年成立的美國聯盟所組成，在1903年時兩個聯盟達成協議，正式承認彼此在美國職業棒球的對等地位並共同成立大聯盟。2000年兩者進一步合併且撤除各自的行政單位，由雙方認定的大聯盟主席負責統一管理。
美國聯盟在1973年實行指定打擊制度，而國家聯盟則保持投手打擊制度至2021年（除2020年時因應新型冠狀病毒疫情造成賽季縮短而短期採取指定打擊制度），2022才開始全面實施指定打擊制度。
大聯盟下級有各級美國職業棒球小聯盟（MiLB），簡稱小聯盟。